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蛋白酶K具有廣泛的底物特異性。即便存在洗滌劑的情況下，其仍可降解許多非變性狀態(tài)的蛋白質(zhì)。蛋白酶K分離自一種可在角質(zhì)上生長(cháng)的真菌白色側齒霉菌(Engyodontiumalbum)（前稱(chēng)腐生真菌(Tritirachiumalbum)。因此，蛋白酶K能夠降解非變性狀態(tài)的角質(zhì)（頭發(fā)），因而稱(chēng)為“蛋白酶K”。1其切割的主要位點(diǎn)為帶有封閉氨基基團、鄰近脂族或芳香族氨基酸羧基端的肽鍵。因其廣泛的特異性，其較為常用。蛋白酶K（ProteinaseK），相對分子量約為29.3kDa,是一種切割...

外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。1983年，外泌體于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養的細胞類(lèi)型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運載...

如何儲存和解凍胎牛血清才不會(huì )使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規則地搖晃均勻。長(cháng)時(shí)間儲存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí)，請勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶，建議無(wú)菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。按如下操作可避免沉...

PicoGreen熒光染料法是一種靈敏的雙鏈DNA檢測方式，通過(guò)Modulus檢測儀可以檢測到pg級的微量DNA。這種方法主要用來(lái)測定微量的DNA殘留，或對DNA樣品進(jìn)行定量。作為DNA染色劑之一的PicoGreen熒光染料特異性地與樣品中雙鏈DNA結合，產(chǎn)生熒光信號。PicoGreen技術(shù)可以檢測到低達0.5納克雙鏈DNA的變化。DNA的微量增加引起熒光信號強度或相對熒光單位（RFU）的顯著(zhù)增加。其自發(fā)熒光忽略不計，重復性標準差異低，不受樣品化學(xué)成分的干擾。Picogree...

市場(chǎng)上的胎牛血清種類(lèi)繁多，魚(yú)龍混雜，很多科研工作者，特別是剛接觸細胞培養的人，難以分辨胎牛血清質(zhì)量的優(yōu)劣。選購胎牛血清請注意以下幾點(diǎn)：一、外觀(guān)拿到胎牛血清，先接觸的是血清外觀(guān)，對于缺少細胞培養經(jīng)驗的人來(lái)說(shuō)，外觀(guān)的判斷尤為重要1、顏色根據血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現出黃色或紅色，我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl，實(shí)際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無(wú)直接影響，這個(gè)指標的意義在于能體現出采血過(guò)程的嚴謹規范程度，良好的操作能降低血清的溶血。國產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散，...

外泌體的提取主要包括以下幾種方式，一是超速離心法，這是目前外泌體提取常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統一的鑒定標準，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心，這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準備工作繁雜，耗時(shí)，量少。四是免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡(jiǎn)單、不...