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真核細胞轉染試劑說(shuō)明書(shū),高效轉染試劑使用方法
真核細胞轉染試劑說(shuō)明書(shū),高效轉染試劑使用方法 2024-02-04

EZTrans細胞轉染試劑作為新一代的轉染試劑,其轉染原理是帶正電的陽(yáng)離子聚合物與核酸中帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過(guò)胞吞作用進(jìn)入細胞。本產(chǎn)品經(jīng)過(guò)李記生物的優(yōu)化處理,具有轉染效率高,細胞毒性低,操作簡(jiǎn)單,重復性好,適用范圍廣等特點(diǎn)。...

  • 影響細胞轉染效率的因素有哪些? 2022-08-19

    細胞轉染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術(shù)。隨著(zhù)分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展,轉染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗中,其應用越來(lái)越廣泛。影響細胞轉染效率的因素有哪些?1.轉染試劑的選擇不同細胞系轉染效率通常不同,但細胞系的選擇通常是根據實(shí)驗的需要,因此在轉染實(shí)驗前應根據實(shí)驗要求和細胞特性選擇適合的轉染試劑。每種轉染試劑都會(huì )提供一些已經(jīng)成功轉染的細胞株列表和文獻,通過(guò)這些資料可選...

  • 核酸純化的方法及原理 2022-08-19

    核酸抽提與純化是分子生物學(xué)試驗的基礎,核酸純化方法是影響提取核酸質(zhì)量高低的最重要因素,也是下游分子生物學(xué)試驗成敗的關(guān)鍵。核酸純化的方法及原理如下:一、PC抽提法PC抽提是去除蛋白質(zhì)有效的手段,但超過(guò)了該飽和度,裂解體系中的蛋白質(zhì)不會(huì )被一次去除,必須靠多次抽提,方可*去除。且每次抽提都會(huì )損失部分核酸。另外,體系太粘稠的壞處是,蛋白質(zhì)難以*去除,以及基因組DNA會(huì )斷裂得更厲害,所以要注意裂解液與樣品的比例。PC抽提的另外一個(gè)用途是,利用酸性酚可以部分去除DNA的特點(diǎn),在RNA抽提...

  • 化學(xué)發(fā)光免疫分析包含免疫分析系統和化學(xué)發(fā)光分析系統 2022-07-22

    在常溫下由化學(xué)反應產(chǎn)生的光,產(chǎn)生電子能級處于激發(fā)態(tài)的物質(zhì),后者通過(guò)躍遷釋放能量產(chǎn)生光子,從而導至的發(fā)光現象?;瘜W(xué)發(fā)光是一個(gè)多步驟的過(guò)程。學(xué)發(fā)光免疫分析(ChemiluminescenceImmunoassay,CLIA)誕生于1977年,是近十年來(lái)在世界范圍內發(fā)展非常迅速的非放射性免疫分析,將高靈敏的化學(xué)發(fā)光技術(shù)與高特異性的免疫反應結合起來(lái)建立的微量測定技術(shù),因此該技術(shù)靈敏度高、線(xiàn)性范圍寬、應用范圍廣。而且CLIA與放射免疫分析(RIA)、熒光免疫分析(IFA)及酶免疫分析(...

  • PCR原理及反應步驟 2022-07-21

    PCR的原理:多聚酶鏈式反應(polymerasechainreaction)簡(jiǎn)稱(chēng)PCR技術(shù),是近30多年發(fā)展起來(lái)的一種體外擴增特異性DNA片段的技術(shù),可在數小時(shí)之內對僅有幾個(gè)拷貝的基因放大千萬(wàn)倍。那么,PCR的原理是怎樣的呢?PCR技術(shù)實(shí)際上是在模板DNA、引物以及原料(四種脫氧核糖核苷酸)在適宜的反應條件下,通過(guò)DNA聚合酶的酶促反應完成DNA擴增的過(guò)程。PCR技術(shù)的特異性取決于引物和模板DNA結合的特異性。PCR反應分為三步:1)變性:通過(guò)加熱時(shí)DNA雙螺旋的氫鍵斷裂,...

  • 影響重組腸激酶活性的因素有哪些 2022-07-20

    腸激酶(Enterokinase,EK,EC3.4.21.9)是一種異源二聚體形式存在于哺乳動(dòng)物十二指腸內的絲氨酸蛋白酶。它能高效專(zhuān)一性的水解工程菌表達的融合蛋白(識別位點(diǎn)是Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)釋放出目的蛋白,被廣泛用于生物工程制藥的開(kāi)發(fā)。牛腸激酶由一條結構亞基(重鏈)和一條催化亞基(輕鏈)構成,二者以二硫鍵結合。據報道,重組腸激酶輕鏈體外具有全酶的酶切特異性,同時(shí)對基因工程融合蛋白底物的酶切活性較提純的牛腸激酶明顯增強。天然腸激酶來(lái)源有限,且從動(dòng)物組織提...

  • 一圖讀懂細胞轉染那些事-part1 2022-06-30

    簡(jiǎn)析各類(lèi)細胞轉染方法細胞轉染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術(shù)。定義隨著(zhù)分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展,轉染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。下文中將從多個(gè)維度,介紹細胞轉染的各類(lèi)小知識。一、瞬時(shí)轉染與穩定轉染哺乳動(dòng)物細胞表達系統能促使在其內表達的蛋?正確折疊并進(jìn)行復雜修飾,表達的蛋?更接近真實(shí)自然狀態(tài),便于模擬真實(shí)細胞內環(huán)境,進(jìn)行蛋白功能研究。把目的基因轉入哺乳動(dòng)物細胞,表達?產(chǎn)蛋?通常有兩種?式:瞬時(shí)轉染與穩定轉染(構建穩定細胞系),如圖...

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